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还原糖测定仪使用手册
点击次数:4563 发布日期:2010-10-20  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负
SGD-Ⅳ型
全自动还原糖测定仪
使用说明书
 
 
山东省科学院生物中心(生物研究所)
山东省生物传感器重点实验室
 
 
 
一、基本原理
    全自动还原糖测定仪(SGD-Ⅳ型)是根据费林试剂测定原理设计而成的,其原理与目前国家标准一致;费林试剂是一种氧化剂,由甲、乙液组成。测定时一定量的甲乙液混合,首先形成氢氧化铜,然后形成酒石酸钾铜络合物。次甲基蓝作为滴定终点指示剂,在氧化溶液中呈蓝色,被还原后呈无色。用标准还原糖滴定时,还原糖首先使铜还原,至铜被还原完毕,才使次甲基蓝还原成无色,即为滴定终点。
    在滴定过程中,溶液颜色逐渐变化:蓝色→深蓝色→浅蓝色→紫红色→淡紫红色→在终点时突然变化至无色透明。

采用光电转换装置,检测滴定过程中透光率的变化(见图一);根据电压变化曲线由仪器控制系统自动记录、采样、确定滴定终点;根据达到滴定终点时消耗的标准还原糖量,由控制系统自动计算出样品中还原糖含量,并显示和打印结果。滴定过程电信号变化及控制原理(见图二)如下:
图一滴定电压的变化曲线
图二全自动还原糖测定仪控制原理图
二、仪器结构
仪器由反应系统、自动控制系统和机壳三部分组成。
1、反应系统
核心部件为反应池,其剖面结构如图三所示。
图三  全自动还原糖测定仪反应池结构图
反应系统由滴定池主体构成;滴定池左右两侧有入射光源和光电转换器,滴定池前后两侧有液体进出管道,滴定池内侧有温度传感器和液体加热电极,根据需要调整液体温度;滴定池底部有电磁搅拌器,使滴定液体均匀混合;上部是进样口,可用移液器将被测样品注入滴定池。
2、自动控制系统
包括电源电路、控制电路、控制面板、微型打印机;按设定程序控制滴定池液体的进出、液体温度、搅拌、光电反应信息的收集和转换、计算、测定结果显示及打印。注射泵自动加入标准液、滴定液、两个蠕动泵可自动完成清洗和排空。全自动还原糖测定仪泵系统如图四所示。
图四全自动还原糖测定仪泵系统结构图
泵管连接:
(1)清洗泵右端口连接硅胶管接蒸馏水瓶(需将该连接硅胶管置于蒸馏水中),左端口连接硅胶管接反应池最上面不锈钢管道(出厂时已连接上)。
(2)排空泵左端口连接硅胶管接废液瓶(需将该连接硅胶管置于自备废液瓶水中),右端口连接硅胶管接反应池最下面不锈钢管道(出厂时已连接上)。
(3)试剂泵甲、乙液注射器端口各自接相应电磁阀的2号口连接硅胶管(出厂时已连接上),电磁阀1号口连接硅胶管接相应甲、乙液试剂瓶(需分别将该连接硅胶管置于按说明书配置的甲、乙液中),电磁阀3号口连接硅胶管接反应池的甲、乙液不锈钢管道(出厂时已连接上)。
(4)滴定泵端口接电磁阀2号口连接硅胶管,电磁阀1号口连接硅胶管接滴定糖瓶(需将该连接硅胶管置于按说明书配置的0.7%滴定糖液中),电磁阀3号口连接硅胶管接反应池滴定糖不锈钢管道(出厂时已连接上)。
三、试剂配制
1、试剂名称:
(1)硫酸铜(CuSO4•5H2O)
(2)氢氧化钠(NaOH)
(3)酒石酸钾钠(C4H4O6KNa•4H2O)
(4)亚铁氰化钾(K4F4(CN)6•3H2O)
(5)无水葡萄糖(C6H12O6
(6)次甲基蓝(C16H18CIN3S•3H2O)
(7)蒸馏水
(8)盐酸
2、试剂准备
无水葡萄糖(C6H12O6)烘干:103℃烘3小时,常温后放干燥器储存备用。
3、试剂配制:
(1)次甲基蓝容液(1.0%):
精确称量次甲基蓝10.0g,蒸馏水完全溶解后定容至1000mL,放置于棕色瓶中备用。
(2)1.00%葡萄糖溶液(定标糖)即10.00克/升葡萄糖溶液:
精确称量烘干无水葡萄糖10.000g,蒸馏水溶解后加入5mL盐酸,定容至1000mL,放冰箱中备用。
(3)滴定糖溶液(0.7%):
精确称量烘干无水葡萄糖7.0g,蒸馏水溶解后加入5.0mL盐酸,定容至1000mL,放冰箱中备用。
(4)甲液:
精确称量11.74g硫酸铜(CuSO4•5H2O),溶解后加入7.0mL次甲基蓝容液(1.0%),定容至1000mL。
(5)乙液:
精确称量4.70g亚铁氰化钾(K4F4(CN)6•3H2O),63.20g氢氧化钠(NaOH),58.50g酒石酸钾钠(C4H4O6KNa•4H2O)依次溶解后定容至1000mL。
(6)特殊样品测定时,根据待测液浓度范围,可选定经我方技术人员确定的费林甲乙液浓度。
 
四、面板
控制面板如图四所示:
图五全自动还原糖测定仪控制面板示意图
模式键:
待机状态下,按【定标】键定标T2。
功能键:
开机(接通电源)后,每按一次【功能】键屏幕显示依次显示如下设置参数选项:
“排空”:排空泵(1)(默认值为11秒),设定排空泵转动时间。
“清洗”:清洗泵(2)(默认值为6秒),设定清洗泵转动时间 。   
“试剂”:试剂泵(3)(默认值为11秒),设定试剂泵转动时间,即控制费林试剂进样量。
“复位1”:试剂泵复位时间(默认值为19秒)。
“复位2”:滴定泵复位时间(默认值为19秒)。
“差值”:采样电压,根据不同的样品选择(默认值为3)。
“次数”:连续测定次数(默认值为10次)。
以上参数可满足特殊用户的需求设定,如设定某项,在其显示状态下输入数值(**.0)并按下输入键,即完成设定,但每次开机均需重复同样的设置。一般用户无需设定。
打印键:按键一次取消打印功能,再按一次恢复打印功能。
清洗键:正在进行滴定(反应)时,按下此键,即可终止当前反应,进入排空清洗,完成后自动进入下一次测定。
复位1:按下此键,试剂泵自动排出进样管道中的气泡。如果一次没有完成排空气泡的话,请再按一次该键,直到管路中无气泡为止。(注意:第一次使用时,由于管路中气泡较多,需要连续几次操作。
复位2:按下此键,滴定泵自动排出滴定糖管道中的气泡。一次没有完成排空气泡的话,请再按一次该键,直到管路中无气泡为止。
注意:第一次使用时,由于管路中气泡多,需要连续几次操作。)
  测定键:滴定反应进行中,液晶显示屏上数字变化时,按下此键,该次测定完成后自动进入待机状态,再次按下此键,又开始下一次测定。待机状态时,按下该键自动进行设定次数的测定,默认10次(“次数”设定项)。
  开始键:仪器接通电源后,按下【开始】键,进入完整测定程序(空白、标定,测定)。
数字符号键:用于进行参数设置时的数字输入。
小数点键:用于进行参数设置时的小数点输入。
五、操作步骤
1、接通电源,打开仪器后部右下侧的电源开关,进入待机状态。
2、按【开始】键,仪器运行。自动进入稳定程序及定标值T1(空白)、T2(标准)的确定,并按照内存设定次数(默认值为10次)完成一组测定。
3、若特殊设置需要调整参数设定,需在打开电源开关后按【开始】键前,重复按压【功能】键进行各参数值设定(如不输入参数值,各参数值则为仪器的初始默认值),按【输入】键完成参数设置。一般不需要重新设定参数,此步骤跳过。
4、仪器打印机打印出T1值之后,需手工进行T2值的标定。待液晶屏显示“定标进样”时,用移液器吸取500微升定标用标准葡萄糖(1.00%即10.000克/升)溶液注入反应池进行定标,反应完成后仪器自动打印出定标值T2。
5、T1、T2值定标完成后,仪器自动进入测定程序。待液晶屏显示“样品进样”时,用移液器吸取500微升待测样品注入反应池,仪器自动完成样品的测定,计算并打印出测定结果。
6、一组样品(按“次数”显示设定的测定次数,不进行设定仪器按默认值为10次)测定完成后,仪器进入待机状态。如需继续测定,直接按【测定】键,进入下一个设定次数的测定循环(如不设定,仪器按默认值为10次)。
特别提示:测定过程中如果需要暂停,可在滴定过程中(液晶显示屏时间数字跳动时)按下【测定】键,该次测定完成后,自动?;?;再次测定只需按下【测定】键,可继续本轮次测定,无需重新定标。
7、待机状态下关闭电源开关,即可关机。
8、特殊操作说明:
(1)滴定过程中(显示屏时间数字跳动时),按下【清洗】键,即可结束该次测定,仪器不打印测定结果,自动重复本次操作。
(2)重新定标T2值。在仪器一组测定循环完成后的待机状态下,按下【定标】键,根据液晶屏显示“定标进样”提示时,注入500微升定标用标准葡萄糖(1.00%即10.00克/升)溶液,仪器自动完成定标并重新打印T2值。再次按下【测定】键,则按照重新定标的T2值完成下一组测定。
(3)重新定标T1值。T1值不能单独定标,如需要重新定标T1值,须在待机状态下,按【开始】键完成T1、T2值定标并进入常规测定程序。
六、注意事项
1、仪器使用稳压电源。
2、仪器使用两周后反应池要清洗,用清洗液浸泡二分钟,再用注射器排出。
3、谨防反应液溅出。
4、反应池装好后请勿随便转动反应池左右两侧耳朵,谨防漏液。
5、正确使用移液器。
6、仪器长时间不用时,排除管道中的试剂,注入蒸馏水。
 
 
七、常见问题及处理措施
出现问题
检查项目
处理措施
开机无反应
检查电源线、
保险管
连接好电源线,
保持保险管完好。
反应池加热不停
检查温度控制器、反应池右耳、搅拌转子
连接好温度控制器插头、反应池右耳旋紧
反应时间显示为99秒
检查甲乙液、注射器、连接管道、搅拌转子、加热温度、发光二极管亮度是否正常,观察滴定是否到终点
保持试剂瓶液面高度,注射器、管道内无气泡、破损、适当调整试剂浓度
 
测定值漂移
 
检查注射器、连接管道,搅拌转子、光源、电磁阀、加热温度、反应池进出口堵塞
保持注射器、连接管道无气泡、破损,搅拌转子、光源工作正常。更换电磁阀,疏
通进出口
打印机不走纸
检查打印机、打印纸
更换打印纸
如遇其他问题,请与本中心技术人员联系
附:
装机清单:
1 还原糖测定仪一台
2 微量进样器一个
3 使用说明书一本
来源:山东省科学院生物中心
联系电话:0531-82605595
E-mail:mengqjun2008@126.com

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